犬瘟热病毒抗体的获得与检测.

德诺泰克 2018-06-28 11:06 本文章2460阅读


概述

犬瘟热是由犬瘟热病毒(Canine distemper virusCDV)感染引起的急性、高接触性传染病。该病的传染性强,发病率高,且临床症状多样,容易继发其他细菌、病毒的混合感染和二次感染,死亡率更是可高达80%,素有“毁灭性传染病”之称[1]


流行病学

犬瘟热一年四季均可发生,但多见于春、冬季节。CDV 的发生似乎有一定的周期性和季节性,通常每 23年流行一次[2]2月龄以内的仔犬因有母源抗体的存在,很少发病,而26月龄的幼犬的发病率较高。随年龄增长,发病率逐渐降低,2岁以上较少感染此病。    病犬为主要传染源,其带毒期不少于5个月。犬瘟热病毒由眼、鼻分泌物、唾液、尿和粪便排出,经消化道感染其他犬只;也可通过飞沫经呼吸道传播;偶尔也有胎盘感染引起流产和死胎。犬只一旦感染该病,早期治疗有一定效果,中晚期多预后不良,且康复犬只长期带毒。因此,免疫预防就成为防控该病的重中之重。


发病机理

犬瘟热自然感染是通过上呼吸道发生的。最初,病毒经由鼻、咽和呼吸道侵入机体后首先在其附近的淋巴结和扁挑体中增殖,24h内在组织巨噬细胞中增殖并扩散至整个细胞,从局部淋巴管到达扁桃体和支气管淋巴结。2~4天后在以上器官内数量急增,并大量进入血液,形成病毒血症,并随感染的单核细胞和中性粒细胞传至肝、脾、骨髓、上皮组织的固有膜和全身的淋巴样器官。4~6天后病毒在脾脏淋巴滤泡、胃及小肠的固有层、肠系膜淋巴结和肝枯否氏细胞内增殖,导致体温升高和白细胞减少(主要是淋巴细胞减少)8~9天后病毒进一步扩散至上皮细胞和神经组织,导致血液性病毒血症,病毒分布于全身,并发生腹泻。9~14天后,病毒扩散至许多组织器官(皮肤、分泌腺、消化道、呼吸道等),约在12~16天发生肺炎,在21~28天出现神经症状而死亡。


机体免疫

犬的免疫方式主要分被动免疫和主动免疫两种形式:

1)被动免疫

A天然被动免疫:母源抗体通过初乳转移给仔犬,使仔犬被动免疫而获得短时间保护。幼犬母源抗体中和滴度大于120时,幼犬能免受CDV的攻击,但这个水平的抗体也能中和疫苗病毒并对接种的疫苗存在封闭效应(2周龄~6周龄)[3]。幼犬体内的CDV母源抗体在8~12周龄开始减弱,15周龄消失。当血清中CDV母源抗体下降到1100以下时较为易感。因此,血清中和抗体滴度1100是免疫接种的指示滴度(相当于德诺犬瘟热病毒IgG抗体快速检测试剂盒的2级)。

B人工被动免疫:犬获得被动免疫,主要是给犬注射犬瘟热单克隆抗体、犬瘟热免疫血清、免疫球蛋白、犬干扰素、胸腺肽等,使犬只获得特异性免疫的能力。

2)主动免疫

主动免疫是指利用抗原刺激(接种疫苗),使机体产生抗体的方法。犬瘟热预防主要手段便是按时接种犬瘟热疫苗。

目前使用的疫苗有灭活疫苗和弱毒疫苗两种。一般来讲,预防接种的意图是在两个水平上阻止病毒增殖:一是在接触到靶细胞之前,感染病毒被抗体中和;二是病毒感染后,CTL(特异性T细胞)可以杀死被感染的细胞。活的弱毒疫苗与强毒一样可以引起体液和细胞免疫反应,而灭活苗只诱发体液免疫。且灭活疫苗还有产生的抗体下降较快,抗原性差,免疫时间短等缺点,现已很少使用。


免疫程序

新生幼犬在哺乳期,因接受了母乳中的母源抗体(母犬未接受疫苗注射的例外),一般不感染本病,故不用接种犬瘟热疫苗。由于母源抗体的干扰作用,此时接种疫苗,效果也较差。仔犬一般用犬瘟热活毒弱毒苗免疫,但由于母源抗体的干扰,直接影响免疫效果,因此应注意免疫时间和免疫次数。

对于未吃上母乳的人工哺乳犬仔:

首免

二免

三免

四免

加强免疫

2周龄

4周龄

6周龄

8周龄

每年1~2

母源抗体不足或犬仔摄取母乳量不足情况下:

首免

二免

加强免疫

45日龄

60日龄

每年1~2

对于吸收较多母源抗体的仔犬:

首免

二免

加强免疫

12周龄

15周龄

每年1~2

为排除母源抗体的干扰,确保免疫效果,可直接通过测定仔犬体内抗体的效价来确定仔犬的具体免疫接种时间。

母犬配种前免疫接种1次,可增强自身免疫力;孕犬在怀孕后期,产前2~4周免疫接种1次,可增强仔犬的免疫力和抗病力。

对于大于16周龄的犬,可间隔2~4周免疫两次,以后每年进行1~2次加强免疫。


影响免疫效果的因素

1)母源抗体的干扰作用

一般认为,当母源抗体的滴度>1:20时,可以抵抗犬瘟热病毒。这时的抗体水平也可能中和疫苗,干扰了疫苗接种,这是导致免疫失败的最主要原因。

2) 诱发感染的影响

诱发感染会降低接种的免疫应答能力。感染组织可以刺激干扰素干扰疫苗的病毒复制,或者产生免疫抑制。研究发现,3周龄的仔犬接种CDV疫苗并感染CPV(犬细小病毒)能够诱发犬瘟热,这是由于CPV弱毒苗发生免疫抑制干扰CDV疫苗的免疫应答[3]

3)物理条件影响

一些物理条件也会抑制免疫应答。如运输时犬笼过密、环境改变、温湿度骤变,群养犬处在高温或高湿条件下等会导致犬瘟热免疫失败。其原因是由于体温过高而导致抑制疫苗病毒的复制。

4)营养条件的影响

研究表明,维生素E和硒的缺乏与免疫抑制有关[3]


免疫程度与抗体的关系

犬的免疫应答包括体液免疫和细胞免疫,体液免疫以IgG为主,抗糖蛋白抗体出现的早晚以及含量的高低是抗CDV感染的重要因素。感染CDV后,犬的康复与其产生的高水平的IgG有关。康复犬的抗体滴度最高,致死性感染犬的抗体很少,甚至没有。一般认为,犬的中和抗体滴度在1:100以上时,能保护其不受CDV攻击[4]


德诺犬瘟热病毒IgG抗体快速检测试剂盒

犬瘟热呈世界性分布,且在不同物种间可交叉感染,所以不可能完全消灭,对犬瘟热尚无特效的治疗药物和方法,疫苗接种是唯一有效的防制措施。因此,快速检测犬瘟热病毒抗体对于该病的预防、诊断、治疗和流行病学分析等具有重要意义。

北京德诺泰克科技有限公司自主研发并生产的“犬瘟热病毒IgG抗体快速检测试剂盒”方便、快捷、准确。仅需10μL样本,便能在10分钟后给出准确的CDV 抗体浓度,以达到快速检测犬瘟热病毒抗体的目的。


参考文献

[1] 林颖、盛明崴、耿庆华、田宝中,犬瘟热的研究进展及其免疫预制[J] 中国畜牧兽医学会家畜内科学分会2009年学术研讨会论文集l CAVIM2009.

[2]孔庆波. 犬瘟热免疫预防研究进展[J] 动物医学进展.200728(6)6975.

[3]孙宁.犬瘟热病免疫失败的研究进展.上海畜牧兽医通讯[J].2004年第4

[4]何洪彬,夏成柱.犬瘟热的诊断及其预防免疫的研究进展[J].动物医学进晨 2001年 第船卷 第1(总第l13).